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Spark® Cyto

Lecteur de plaques avec imagerie des cellules vivantes et cytometrie en temps reel

Spark Cyto est un lecteur de plaques multimode doté de capacités d’imagerie par fluorescence et de cytométrie, qui ouvre de nouvelles possibilités pour vos recherches sur les cellules. En associant l'imagerie des cellules vivantes à des technologies de détection de pointe, vous avez désormais la capacité de regrouper des informations qualitatives et quantitatives dans des ensembles de données multi-paramètres uniques.

Vos cellules ne restent pas statiques quand vous quittez le laboratoire, votre recherche a donc besoin d’un instrument dynamique qui vous garantisse de ne jamais rater un événement-clé. Spark Cyto fonctionne en temps réel, en utilisant l'acquisition et l'analyse de données parallèles pour fournir des informations pertinentes plus rapidement qu'avant.

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Révolutionnez vos expériences cellulaires pour ne jamais manquer un événement biologique critique.




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Tab 01 / Présentation
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Plus d'informations fournies en temps réel, découvrez de nouvelles approches avec Spark Cyto

Plus de cellules analysées

Spark Cyto rassemble de façon unique les composants d’une caméra haut de gamme dotés d’une technologie exclusive (brevet en instance), pour vous garantir de pouvoir vraiment enquêter sur l’ensemble de votre population cellulaire. Ce dispositif permet d’enregistrer le puit entier d’une microplaque de 96 ou 384 puits en une seule image, sans raccords de mosaïques d’images et sans déformation. Cela signifie que vous ne manquez jamais une cellule lorsque vous enquêtez sur la totalité de la population cellulaire dans un puit de microplaque. Spark Cyto comporte trois niveaux de grossissement combinés à quatre canaux pour la fluorescence et l'imagerie en champ clair, ce qui permet d’avoir une analyse cellulaire de haute qualité pour une grande variété d'applications.

En savoir plus sur le module d'imagerie cellulaire

Lancement de Spark Cyto à SLAS Europe 2019 - Lynda O'Leary

Plus de paramètres mesurés

Spark Cyto est disponible en différentes configurations, basées sur les éléments fondamentaux de la plate-forme de lecteur multimode Spark. Ce dispositif associe une imagerie sophistiquée à des capacités de lecteur multimode éprouvées, ce qui vous permet de définir de nouvelles approches pour votre recherche et d’obtenir des données solides plus vite que jamais auparavant.

En savoir plus sur les fonctions de détection du Spark Cyto

Un débit accru pour vos expériences

Le Spark Cyto peut être amélioré avec l’ajout d’un incubateur automatisé pour cellules avec une capacité de plusieurs plaques ou intégré aux solutions robotiques entièrement automatisées de Tecan.

Découvrez comment accélérer vos recherches En savoir plus sur les fonctions de détection de Spark Cyto

Plus de contrôle expérimental

Conçu pour gérer un large éventail d'applications de cytométrie courantes, Spark Cyto vous apporte un nouveau niveau de contrôle expérimental sans compromettre la facilité d'utilisation et la commodité. Cinq méthodes prédéfinies pour des applications communes de cytométrie offrent une approche directe de l'acquisition et de l'analyse d'images, complétée par des fonctions supplémentaires comme les paramètres « définis par l'utilisateur » et le contrôle expérimental en temps réel (REC™), ce qui vous ouvre de nouvelles possibilités d'application

En savoir plus sur SparkControl™ et Image Analyzer™

Les capacités du Spark Cyto*

Applications

  • Comptage des nucléi
  • Efficacité de la transfection
  • Viabilité cellulaire
  • Apoptose
  • Évaluation de la confluence
  • Migration cellulaire et cicatrisation des plaies
  • ELISA
  • Quantification ADN/ARN à faible volume
  • Efficacité du marquage des acides nucléiques
  • Quantification des protéines
  • Tests de gène rapporteur
  • HTRF®, DELFIA®, LanthaScreen®
  • Transcreener®
  • DLR®
  • BRET –comprenant NanoBRET®
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Modes de détection

  • Imagerie en fluorescence (bleu, vert, rouge, rouge lointain)
  • Imagerie à champ clair
  • Imagerie numérique à contraste de phase
  • Absorbance – avec UV/VIS
  • Fluorescence haut et bas
  • Fluorescence résolue en temps(TRF)
  • Capacité complète de balayage spectral pour tous les modes de mesure
  • FRET
  • TR-FRET
  • Polarisation de fluorescence (PF)
  • Luminescence : glow, flash, multicolore, balayage
  • AlphaScreen®, AlphaLISA® et AlphaPlex®
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Fonctionnalités supplémentaires

  • Distributeurs de réactifs avec chauffage et agitateur
  • Cassette d’humidité
  • NanoQuant Plate™
  • Outils de contrôle qualité pour les services de QI/QO
  • Empileur de microplaques Spark-Stack™
  • Extension au moyen d’un incubateur automatisé pour cellules avec une capacité de plusieurs plaques.
  • Tecan Connect™ application mobile pour surveiller l'instrument

* Les capacités dépendent de la configuration du Spark Cyto.




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Tab 02 / Technologie
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Une optique conçue pour apporter rapidité et clarté

Un dispositif optique dédié à la cytométrie des cellules vivantes sur microplaques

Le module d’imagerie à fluorescence Spark Cyto est conçu pour fournir des images nettes avec une intervention minimale de l’utilisateur. Utilisant trois objectifs différents, cinq LED (champ lumineux et excitation de la fluorescence), un ensemble de filtres multibande et une caméra CMOS 12 bits, Spark Cyto supprime les décalages de pixels et fournit des images de haute qualité à la vitesse de l’éclair.

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Diagramme schématique du module d'imagerie. (1) LED pour champ clair ; (2) microplaque avec échantillon ; (3) objectif ; (4) ensemble de filtres multibande ; (5) LED et filtres d'excitation de la fluorescence ; (6) unité Autofocus ; (7) miroir de réflexion ; (8) caméra CMOS.

Changeur d’objectif intégré avec des objectifs 2x, 4x et 10x.

Sélection facile des objectifs et des canaux

Spark Cyto possède trois objectifs intégrés qui peuvent être facilement sélectionnés dans le logiciel SparkControl™:

  • 2x, ouverture numérique = 0,08
  • 4x, ouverture numérique = 0,13
  • 10x, ouverture numérique = 0,30

Le dispositif comporte également cinq canaux à LED pour satisfaire aux exigences de votre essai sans que vous ayez à intervenir manuellement.

  • Bleu (381-450 nm)
  • Vert (461-530 nm)
  • Rouge (543-611 nm)
  • Rouge lointain (626-800 nm)
  • Contraste champ clair et phase numérique
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Des images composites sans décalage de pixels

Le système optique n’a pas besoin que l’on déplace l’optique ou que l’on transporte la plaque pour voir l’image d’un puits avec n’importe quelle combinaison des cinq canaux disponibles. Ce dispositif élimine les décalages de pixels et procure une qualité d'image et une vitesse d'acquisition remarquables, en particulier lorsqu’on se sert de deux canaux ou plus.

Avec l’autofocus activé, vous restez concentré sur votre recherche

Spark Cyto utilise un système d’autofocus à LED (brevet en instance) pour fournir des images précises sans compromettre le temps de balayage. Le système d'autofocus projette un quadrillage étendu sur la surface de l'échantillon, ce qui minimise l'impact des déformations potentielles et des impuretés isolées, puis il se sert de ce schéma comme guide pour trouver la mise au point optimale pour vos échantillons. Un autofocus simple, rapide et efficace, de série sur chaque instrument, pour que vous ne ratiez jamais une image.

Live Viewer™

L'application logicielle Live Viewer permet d’utiliser Spark Cyto comme un cytomètre d'image, et de pouvoir ainsi surveiller les cellules en temps réel. Tous les canaux optiques et niveaux de grossissement sont disponibles dans Live Viewer, qui peut être utilisé depuis l'écran du tableau de bord du logiciel comme une application dédiée, ou depuis l'interface de l'éditeur de méthodes, afin d'optimiser des paramètres comme le décalage de focalisation ou la diaphonie entre les canaux de fluorescence avant de commencer une mesure.

Analyser la situation d’ensemble

Une seule image de puit entier sur une plaque de 96 puits. L’absence de déformation optique d’habitude due aux mosaïques d’images ou aux images mises bord à bord permet d’obtenir de meilleurs résultats dans l’analyse des populations cellulaires.

Une image complète des puits sur des plaques de 96 et 384 puits

Spark Cyto vous permet de voir en entier, sur une seule image, les puits d’une plaque de 96 ou de 384 puits, et d’avoir un aperçu de chaque cellule dans chaque puit. L’utilisation de la technologie exclusive Spark Cyto à large champ de vision (brevet en instance), permet d’obtenir des images intégrales et de grande qualité des puits, sans être gêné par des points d’assemblage ou par des contrastes d’images mises bord à bord. Cela vous donne une vision complète de votre population cellulaire en moins de temps, ce qui vous permet d’orienter votre recherche dans de nouvelles directions.

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Une seule image de puit entier sur une plaque de 96 puits. L’absence de déformation optique d’habitude due aux mosaïques d’images ou aux images mises bord à bord permet d’obtenir de meilleurs résultats dans l’analyse des populations cellulaires.

Une seule image peut tout révéler

De nombreux systèmes d’imagerie vantent leur capacité à vous fournir des images de haute qualité d’un puits entier, mais pour la plupart, ils ne parviennent pas à le faire efficacement. Ces systèmes créent des images composites, obtenues en créant des mosaïques ou des assemblages, ce qui ne donne pas une représentation exacte de la population cellulaire, et ces images sont également déformées à cause des ombres des ménisques de liquide sur les bords des puits.

Spark Cyto saisit l’intégralité du puits (sur des plaques de 96 et de 384 puits) en une seule image qui vous donne une représentation réelle de votre recherche.

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Schéma d’imagerie d’un puit entier, enregistrement de 24 puit à l’aide de l’objectif 4x.

Imagerie d’un puit entier dans d’autres formats de plaque

Les lignées cellulaires primaires ont tendance à afficher une meilleure dynamique de croissance dans les plaques de 6 à 48 puits. Spark Cyto permet d’avoir une imagerie complète du puit pour ces applications, basée sur la production automatique d'images composites constituées d’une mosaïque de plusieurs images.

Spark Cyto est optimisé pour les plaques de culture cellulaire de Tecan et cette association garantit la meilleure qualité d'image possible pour vos tests cellulaires.




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Tab 03 / Applications
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Cinq applications prédéfinies, encore plus de possibilités

Des méthodes intuitives d’acquisition et d’analyse d’images

Spark Cyto a une approche conviviale des applications de cytométrie les plus courantes :

  • confluence
  • comptage nucléique
  • efficacité de la transfection
  • viabilité cellulaire
  • mort cellulaire

Pour toutes autres applications, sélectionnez simplement l'option "user-defined" pour facilement mettre en place votre propre méthode sur Spark Control, ou utilisez l'option "image-only" pour exporter vos fichiers à un logiciel d'analyse d'image. Cela vous apporte une flexibilité complète pour répondre à vos besoins.

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Dr. Jens Peter von Kries - Head of Screening Unit.Leibnitz Forschungsinstitut FMP & MDC

Image complète d’un puit d’une plaque de 96 puits, obtenue avec l’objectif 2x ; cellules NNNHDF avec masque d’évaluation de la confluence.

Confluence

Utilisez le canal d'imagerie à champ clair pour avoir un aperçu rapide de la densité cellulaire d'un puit. La confluence des cellules est calculée automatiquement par le logiciel et affichée sous forme de calque jaune pour faciliter la vérification visuelle. De plus, vous pouvez personnaliser le facteur de rugosité, une mesure qualitative, comme un simple indicateur de mort cellulaire.

Image entière de 384 puits obtenue avec l’objectif 4x ; cellules CHO avec masque d’objet de comptage nucléique.

Comptage des nucléi

Optimisée pour Hoechst 33342, cette fonction offre une méthode facile de comptage cellulaire sur Spark Cyto, en utilisant tout colorant fluorescent bleu doté de capacités de liaison à l’ADN nucléaire.

Image centrée de cellules CHO cultivées dans une plaque de 96 puits, obtenue avec l’objectif 4x, montrant une superposition des canaux bleu et vert.

Efficacité de la transfection

Cette application est conçue pour déterminer automatiquement le taux de transfection des cellules contenant des protéines fluorescentes vertes (GFP), une substance de référence largement utilisée pour l’expression des gènes, et colorée à l’aide du colorant de nucléi bleu Hoechst 33342. Les images vertes et bleues sont superposées et analysées pour déterminer l’efficacité de la transfection obtenue dans la population cellulaire.

Image centrée de cellules HeLa cultivées dans une plaque de 24 puits, obtenue avec l’objectif 10x, montrant une superposition du champ lumineux, des canaux vert et rouge.

Viabilité cellulaire

L’application de viabilité cellulaire prédéfinie de Spark Cyto repose sur une approche courante de double coloration pour distinguer les cellules vivantes (vertes) des cellules mortes (rouges) dans une population. À l’aide de deux colorants fluorescents, comme la calcéine AM (cellules vivantes) et d’iodure de propidium (cellules mortes), vous pouvez visualiser et analyser votre population en quelques minutes.

Image de cellules A431 cultivées dans une plaque de 96 puits, obtenue avec l’objectif 10x, montrant une superposition des canaux bleu, vert et rouge.

Mort cellulaire

On peut détecter l'apoptose et la nécrose et parvenir à les discerner l’une de l’autre en effectuant une coloration différentielle des marqueurs caractéristiques du type de mort cellulaire, par exemple, avec du Hoechst 33342, de l’iodure de propidium et de l'Annexine V-FITC.

Hoechst 33342 (bleu) : noyaux teintés
Iodure de propidium (rouge) : coloration cellulaire nécrotique
Annexine V-FITC / Alexa Fluor® 488 (vert) : se lie au marqueur d'apoptose précoce phosphatidylsérine
Grâce à un algorithme propriétaire, le logiciel peut identifier uniquement trois classes d'objets :

  • Objets bleus : noyaux cellulaires
  • Objets bleus/rouges : cellules nécrotiques (pour le ratio cellules vivantes/cellules mortes)
  • Objets bleus/rouges/verts : cellules apoptotiques (pour le ratio cellules apoptotiques/celllules nécrotiques)
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Analyse multi-couleurs

L’application Multi-Color du Spark Cyto est simple à utiliser et idéale pour le décompte et l’analyse des cellules à plusieurs marqueurs, en utilisant un marqueur fluorescent pour le noyau et jusqu’à deux marqueurs supplémentaires pour caractériser automatiquement vos cellules.

Transmission

Encore plus de possibilités

L'éditeur de méthodes de Spark Cyto offre deux options uniques aux chercheurs qui souhaitent personnaliser leur test :

  • Une fonction « Définie par l'utilisateur » permettant de configurer des protocoles d'imagerie spécifiques pour obtenir et analyser des images automatisées
  • Une fonction « Image uniquement » permettant d’obtenir et d’exporter des fichiers vers tout logiciel tiers d'analyse d'image, comme Image J ou CellProfiler.

Le contrôle expérimental en temps réel (REC™) : ne manquez jamais un événement biologique essentiel !

REC vous donne la possibilité de créer de nouveaux flux de travaux d’expérimentation dans votre laboratoire. Associant des technologies de détection standard, des capacités d'imagerie et des fonctionnalités supplémentaires uniques (comme les contrôles d'humidité et les contrôles environnementaux intégrés), REC ouvre de nouvelles possibilités de recherche.

Avec cet ensemble de fonctionnalités, REC vous permet de configurer des flux de travail garantissant que vous ne manquerez jamais un événement biologique essentiel, sans que vous soyez obligés de tout surveiller en permanence.

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Le contrôle environnemental complet est de série

Spark Cyto dispose d'un ensemble unique de fonctionnalités environnementales pour contrôler les conditions de mesure dans votre microplaque :

  • Contrôle uniforme de la température (jusqu’à 42 °C)
  • Contrôle dynamique des gaz (CO2 et O2)
  • Contrôle de l’humidité via le Lid Lifter™ et la cassette d’humidité

Associées, ces caractéristiques vous permettent de maintenir un environnement stable pour vos tests, et d’éliminer efficacement les risques que des fluctuations de température ou une évaporation pourraient représenter pour vos résultats. Spark Cyto est le seul instrument capable de mettre très simplement ces fonctionnalités à votre portée.

Toutes ces fonctions sont facilement programmées et commandées avec le logiciel SparkControl.

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Contrôle de l’humidité pour une protection optimale contre l’évaporation

Le maintien d’un taux d'humidité de 95 % ou plus est fondamental pour la viabilité et la croissance de cellules non altérées, et la minimisation de l'évaporation est essentielle pour conserver des concentrations cohérentes pendant des essais à long terme. La cassette d'humidité de Spark (brevet en instance) est une solution économique pour minimiser l'évaporation.

Le Lid Lifter

Cette fonction de levage du couvercle intégrée et brevetée du Spark crée de nouvelles possibilités de flux de travail, en réduisant le risque de contamination des échantillons et en contribuant à la mise en place d’un environnement idéal pour les tests cinétiques à long terme. Que vous souhaitiez distribuer des réactifs sans devoir intervenir manuellement ou que vous souhaitiez maintenir des conditions environnementales optimales sans compromettre la protection contre l’évaporation, Spark Cyto est le seul lecteur à offrir cet avantage.

Un logiciel conçu pour des études à long terme

Spark Control combine l'automatisation des tests cinétiques à long terme et des fonctionnalités avancées comme le conditionnement cinétique et la surveillance à distance, en fournissant une solution pratique pour les configurations expérimentales complexes.Les expériences cinétiques sur des cellules nécessitent des actions spécifiques quand un certain seuil est atteint. Les lecteurs multimode sans cinétique conditionnelle font que ces études sont fastidieuses et potentiellement sujettes à des erreurs. La fonction de conditionnement cinétique de SparkControl vous permet de programmer le système pour qu'il exécute automatiquement toute action requise dès qu'un seuil prédéfini est atteint, ce qui vous permet de gérer tous les flux de tests que vous voulez.




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Tab 04 / Logiciel
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Spark Control™ : la puissance du contrôle dans un progiciel intuitif

SparkControl, le meilleur logiciel d'interface utilisateur de sa catégorie, comporte désormais une solution d'imagerie dédiée, conçue spécifiquement pour Spark Cyto. Cette fonctionnalité d'imagerie peut être associée à n'importe quelle fonctionnalité qui existe dans SparkControl, elle simplifie et facilite la création de tests multiplex. La nouvelle fonctionnalité d'imagerie est rationalisée pour que l’opérateur ait le contrôle total de tous les paramètres associés à son expérimentation, sans le surcharger d’informations superflues et sans lui faire perdre un temps précieux.

Le puissant logiciel de commande de lecteur de Spark Cyto, SparkControl , comporte une nouvelle fonctionnalité dédiée destinée à configurer et à optimiser les protocoles d'imagerie cellulaire automatisés. Cette fonctionnalité de programmation d’imagerie peut être associée à n’importe quelle autre bande de programmation des méthodes de détection traditionnelles pour faciliter le multiplexage. L'opérateur peut sélectionner les canaux d'objectif et d'imagerie de son choix, définir le champ de vision, contrôler tous les paramètres associés à la mesure, ou sélectionner l'une des méthodes prédéfinies pour les applications d'imagerie cellulaire standard. Un lien rapide vers le mode Live Viewer de type microscope donne un accès immédiat aux paramètres d'acquisition d'images.

Le logiciel SparkControl™ possède un mode live viewer qui transforme le lecteur en microscope numérique, permettant une inspection manuelle des cellules, ainsi qu’une optimisation des niveaux de mise au point, des temps d’exposition et des intensités de LED.

 

Tecan Connect™ mobile app

Stay connected with your experiment wherever you are. Use the Tecan Connect mobile app to monitor instrument status and alert you when user interactions are required.

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Image Analyzer™ : un outil d’analyse solide et accessible

Les images obtenues avec Spark Cyto peuvent être traitées automatiquement avec Image Analyzer, le progiciel d'imagerie exclusif de Tecan. Image Analyzer vous offre tout un éventail d’options de personnalisation qui vous facilite l’ajustement et l’optimisation de vos paramètres d’imagerie.

Image Analyzer montrant des cellules cancéreuses A431 après induction de l’apoptose, colorées en trois couleurs pour permettre de déterminer la numération cellulaire (Hoechst), l’apoptose (Annexine V-FITC / Alexa Fluor® 488) et la nécrose (iodure de propidium). La fonction Analysis Settings permet de paramétrer la segmentation des objets et le comptage ultérieur.

L’Analyseur d’images du Spark Cyto offre une analyse simple des données pour la segmentation, la synchronisation et le décompte des objets.

Bio-Formats compatibility

Images are saved in widely used jpg or tiff formats to make image analysis with alternative software products easyand seamless. In addition, Bio-Formats – an open  source software plug-in that works with 150+ microscopy formats – is able to read Spark Cyto results, helping to simplify the use of a wide range of analysis tools.




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Tab 05 / Configurations
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Des configurations adaptées à vos applications

Spark Cyto existe en quatre configurations spécialisées, qui ne diffèrent que par leurs modalités de détection. Cela signifie que quelle que soit la configuration de votre Spark Cyto, vous disposez d'un système entièrement équipé et prêt pour la cytométrie en temps réel par imagerie cellulaire.

Chaque configuration de Spark Cyto comporte les fonctionnalités suivantes pour la cytométrie en temps réel, qui redéfinissent véritablement la liste des éléments de série sur un lecteur de microplaques à système d'imagerie :

  • Lid Lifter™
  • Contrôle intégré des gaz (CO2/O2)
  • Chauffage
  • Autofocus à LED
  • Objectifs (2x, 4x et 10x)
  • Excitation de 5 LED, 4 canaux de couleur
  • Contraste de phase numérique
  • Logiciel SparkControl™
  • Logiciel Image Analyzer™
  • Boîtier de commande d’instrument

En option, les quatre configurations peuvent être associées à des fonctionnalités supplémentaires - voir la présentation générale.




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Tab 06 / Accessoires
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Automatisation pour un meilleur débit

Le concept Spark Motion de Tecan permet une automatisation des expériences sur cellules avec un maximum de 40 plaques.

  • Une incubation automatisée des cellules et une analyse d’un maximum de 40 plaques
  • L’analyse de cinétique de croissance multiplex ( ex. luminescence et imagerie) renforce la reproductibilité
  • La technologie brevetée d’ouverture du couvercle dans le Spark Cyto protège les plaques même en dehors de l’incubateur permettant d’économiser les coûts liés à l’acquisition d’une enceinte de sécurité biologique dédiée.
  • Extension possible au moyen d’instruments supplémentaires
Intéressé(e) par l’automatisation complète de votre plan de travail?

Découvrez-en plus sur les solutions entièrement automatisées de Tecan

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L’empileur de plaques Spark-Stack™*

Spark-Stack est un empileur de plaques compact et automatisé, qui s’intègre aux lecteurs Spark. Il permet de traiter de façon fiable jusqu’à 50 plaques par cycle.

Des injecteurs avec chauffage et agitation

Des injecteurs intégrés permettent la distribution automatisée de réactifs, idéale pour les applications à haute sensibilité comme la luminescence flash. Un chauffage/agitateur amovible réduit le risque de précipitation.

Humidity Cassette

Une protection intégrée contre l’évaporation optimise les essais cinétiques sur cellules vivantes, en minimisant les effets de bord, pour une meilleure uniformité et des données plus fiables.

Une « Humidity Cassette » brevetée réduit l’évaporation dans les microplaques standard, et permet d’effectuer des études cinétiques de longue durée sur cellules vivantes, sans avoir besoin de prendre des microplaques spéciales et coûteuses, mais en utilisant simplement vos plaques habituelles, celles qui vous conviennent.

Parmi les avantages dont vous pourrez bénéficier, citons :

  • La réduction de l’évaporation pendant votre essai
  • La conservation des plaques que vous utilisez déjà (pas besoin d’investir dans des plaques spéciales et onéreuses)
  • Des données de meilleure qualité, des résultats cohérents
  • Des effets de bord atténués, l’idéal pour des essais cinétiques menés sur une longue durée
  • Des conditions stables, et donc une meilleure viabilité des cellules
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Tecan Connect™ mobile app

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Pour la QI/QO des lecteurs de microplaques Tecan

Grâce aux progiciels de contrôle qualité de Tecan, vous arriverez à respecter toutes les exigences réglementaires de manière rentable et efficace.

Lire plus

* Spark-Stack microplate stacker prend en charge tous les modes de lecture sans imagerie.




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Tab 07 / Webinaires
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Webinaires Spark Cyto

En associant l’imagerie des cellules vivantes à des technologies de pointe en détection, vous avez désormais la capacité de regrouper des informations qualitatives et quantitatives dans des ensemble de données prenant en compte de multiples paramètres.

Ces webinaires éducatifs expliquent comment les scientifiques font progresser la recherche tout en donnant naissance à des nouvelles techniques d’analyse cellulaire.

Ne manquez jamais un événement biologique majeur grâce à une imagerie améliorée du puits en entier

Dr Stefan Hasenöder, Sirion Biotek

Ce webinaire vous explique comment améliorer la robustesse de vos tests sur cellules vivantes afin de traiter et de surmonter certaines causes spécifiques des problèmes de reproductibilité.

Nouvelles méthodes permettant de mieux prévoir les réactions des patients aux médicaments dans les organoïdes cancéreux au moyen d’un lecteur de plaques multi-modes avec un module d’imagerie

Prof. adj. Dannielle Engle, SALK Institute

Le cancer du pancréas est une tumeur maligne fatale dont les options de traitement sont peu nombreuses. Ce webinaire explique comment des mesures dynamiques de confluence dans les modèles d’organoïdes de patients atteints de maladies pancréatiques peuvent prévoir leurs réactions aux traitements.

Tests multiplex semi-automatisés visant à surveiller la réaction au traitement dans les organoïdes en 3D de patients

Dr Christoph Deben, Université d’Anvers

Ce webinaire vous explique comment mettre en place des plans de travail expérimentaux et des techniques d’analyse multiplex pour suivre les réponses des cellules aux médicaments en temps réel.

Streamlining high-content cytotoxicity assay development

Dr. Christopher Wolff, FMP

If you are looking for a fast, uncomplicated and effective way of developing cytotoxicity cell painting assays, you won’t want to miss this webinar. Join Christopher Wolff from FMP Berlin and Christian Oberdanner from Tecan in an informative illustration of the precise and sensitive characterization of cytotoxicity based on multicolored imaging with Spark Cyto.

Advantages of tumor-specific 3D models

Dr. Julia Kirshner, zPREDICTA Find out about the benefits of using 3D culture models in oncology drug discovery. This webinar will focus on the importance of the tumor micro-environment and tissue-associated extracellular matrix (ECM) for obtaining accurate drug response data, using the novel analytical capabilities of the Spark® Cyto multimode imaging plate reader.

Harnessing HT metabolomics and phenotypic profiling for cancer research

Metabolic profiling of cancer cell line collections has become an invaluable tool in the study of disease etiology and drug modes of action, as well as for selecting personalized treatments. However, its scale is limited by time-consuming sampling and complex measurement procedures. Discover how the Institute of Molecular Systems Biology at ETH Zurich has developed a high throughput metabolomics platform to overcome these bottlenecks, using timelapse microscopy to combine dynamic phenotypic and molecular profiling at high throughput.

Novel cell models for rapid screening of SARS-CoV-2 infection studies

Dr. Marek Widera, Alexander Wilhelm

To decipher the pathology of COVID- 19, in vitro cell culture models that can physiologically mimic the viral replication cycle are required. This webinar introduces the A549-AT cell line, generated to meet this need and enable rapid and sensitive monitoring of SARS-CoV-2 replication and facilitating the characterization of viral variants.

Live-Cell, Real-Time Cell Imaging and Analysis for Drug Discovery

Understanding when and how cells die following drug treatment is critical in the drug discovery and characterization process. However, traditional cell-based experiments that rely on endpoint data collection lack the details to answer these questions. Learn how to make more informed decisions on drug candidates with live-cell imaging and kinetic data using high-throughput amenable assays and instruments.

Gaining insights into DNA damage response (DDR) in cancer cells with image-based quantification

Maintenance of genome integrity is essential for the prevention of mutations and cellular transformation, which can give rise to cancer. Find out how the Spark® Cyto was used to gain insights into DNA repair dynamics in living cells and study the DDR upon treatment with chemotherapeutic agents in fixed cells.

Advantages of new AI-based stain-free cell analysis for cancer research

Dr. Roland Zauner, EB House Austria

In various cell-based assays, the number of cells is either determined as the primary measurement, as in proliferation assays, or used as a reference to normalize readouts. Find out how the new label-free cell segmentation tool can be applied in anti-cancer drug screenings and how research into the genetic skin disease epidermolysis bullosa will benefit from this development.

Whole-Well Brightfield Cell Counting with the Latest in Microplate Imaging Technology

Dr. Christopher Wolff, FMP

Label-free imaging and analysis of cells using the brightfield imaging channel is a non-invasive, non-toxic alternative to fluorescent microscopy, but is challenging using conventional microscopes and automated imaging systems. Find out how cutting-edge neural network-based algorithm technology enables rapid, label-free cell counting, creating new opportunities for researchers to conduct live cell experiments and cell analysis.




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Tab 08 / Docu-mentation
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Brochures

The Spark Cyto is a multimode reader platform equipped with a highly sophisticated fluorescence imaging module for real-time cytometry.

Guide d'application

Notes d’application

Severe acute respiratory syndrome coronavirus-2 (SARS-CoV-2) has become a global concern, due to its rapid spread. The study, published by the University of Frankfurt, describes the use of the Spark Cyto for the development of a cellular infection model that enables high throughput SARS-CoV-2 experiments and live cell imaging. The automated, non-invasive optical readout included assessment of confluency, roughness factor and fluorescence measurement. The data further highlights the use of the cell line for screening for antiviral compounds as well as for investigating the efficacy of neutralizing antibodies against different SARS-CoV-2 variants.

This application note systematically defines experimental parameters to enable live cell nuclear staining with minimal cytotoxicity during repeated exposure and continuous fluorescence imaging in the Spark Cyto, as well as robust automated cell segmentation with the SparkControl™ and Image Analyzer™ software.

The optimized procedure was used in a multiplexed, three-color assay to detect and distinguish early and late stages of apoptotic cell death, opening the door for dynamic long-term phenotype tracking.

Alzheimer’s disease (AD) and vascular dementia (VaD) are the two most common types of dementia, and their incidence is increasing year by year. They affect the health of the elderly, and cause a huge burden on society, with no effective treatments currently available.

In vitro research is the first step in drug evaluation, and cellular immunofluorescence can be used to more clearly define the role of drugs, provide more comprehensive and accurate information for downstream drug development.

This study uses the Spark Cyto – an innovative multimode reader with cell imaging capabilities – to evaluate the neuroprotective effects of miR-23b-3p (miRNA) and tilianin (compound) on stable transfected cell lines and human primary neurons. The results in this application note are based on a peer-reviewed article, published in the journal Oxidative Medicine and Cellular Longevity in August,2021, with the title: Tilianin Ameliorates Cognitive Dysfunction and Neuronal Damage in Rats with Vascular Dementia via p-CaMKII/ERK/CREB and ox-CaMKII-Dependent MAPK/NF-κB Pathways.

Scientific innovation is dependent on the power of observations, and the strength of the conclusions drawn from those observations. In in vitro biology, a majority of physiologically relevant outcomes adhere to dose- and exposure-dependent factors. Unfortunately, data collection for traditional cell-based experiments often occurs at arbitrary but convenient endpoints, and using inadequate or poorly informative tools. The resulting data typically lack the appropriate kinetic resolution to fully answer details of the cause-and-effect relationship. Because biological pathways and processes are already inherently complex, a more efficient screening paradigm is required, allowing scientists to examine the important parameters of ‘when’ and ‘how’ to better characterize a given response. This application note seeks to provide a practical demonstration of how real-time assays and a plate reader with bright field and fluorescence imaging functionality can work in unison to reveal cell- and compound-specific features of an apoptotic response.

This application note describes the outcome of an experiment comparing the Opera Phenix with the Spark Cyto for the detection of apoptotic cells. For this study, Hoechst 33342 was used as a ‘blue’ nucleic counter stain, with TMRM and YO-PRO-1 as the two secondary mask signals. Please note that findings presented here do not necessarily reflect the general performance difference between the two systems.

Workflow automation with the Spark Cyto multimode reader.

Quantification of life: Dead less ratio with the Spark Cyto imaging cytometer.

Quantification of life: Dead less ratio with the Spark Cyto imaging cytometer.

Automated monitoring of the reporter activity of hfob.1.19 cells following induction of osteogenic differentiation by temperature shift

While 3D cultures are superior to the 2D culture approaches in terms of physiological tissue organization and providing robust prediction of clinical outcomes, these techniques are often more expensive and time consuming to perform compared to the standard 2D protocols. Performing multiplexed assays with various readouts is therefore beneficial in order to gain the most information from each experiment. Here, we describe a multiplexed approach combining sequential imaging based LIVE/DEAD cell viability assays (Thermo Fisher Scientific) and CellTiter Glo luminescence analysis (Promega) using the Tecan Spark Cyto with r-Breast and r-mBreast models.

The genomic integrity of mammalian cells is constantly challenged by DNA damage arising from both endogenous and exogenous sources. Complex DNA repair pathways have evolved to deal with specific types of DNA lesions. An efficient DNA damage response (DDR) requires immediate detection and repair of the damage.

In addition, cell cycle checkpoints need to be activated to allow enough time for repair, prevent further damage through collision of the replication and transcription machinery with unrepaired lesions, and ensure that lesions are not passed on to daughter cells.

While impaired DDR can lead to serious diseases like cancer, it also presents an opportunity for therapeutic interventions exploiting these repair defects. 1 DNA repair is a highly dynamic process involving distinct and well-coordinated steps, and should therefore ideally be studied in living cells.2 However, a lot of post-translational modifications essential for the DDR can only be analyzed in fixed cells.

Highly aggressive cutaneous squamous cell carcinomas (SCCs) occur particularly frequently and early in patients suffering from the rare genetic skin disease recessive dystrophic epidermolysis bullosa (RDEB), causing a high mortality rate...

The essence of 3D liver tissue reconstruction lies in creating functional liver tissue outside of the body, mimicking the native ECM and microenvironment. This approach offers several advantages. First, it enables the study of liver pathophysiology and disease mechanisms, leading to better understanding of novel therapeutic targets. From a regenerative medicine standpoint, 3D liver tissue reconstruction offers patient-specific solutions; patient-derived tissues can be created using primary liver cells, minimizing the risk of immune rejection and eliminating the reliance on donor organs. These engineered liver tissues hold great promise for transplantation and tailored treatment plans. Furthermore, 3D liver tissue models provide an ethical and clinically relevant platform for drug testing, reducing the need for animal testing. This application note describes the combination of Tecan’s Spark Cyto reader with Predictive Oncology’s r-liver-tox set-up to perform multiplexing investigations, including live/dead cell analysis, detection of intracellular production of reactive oxygen species (ROS) and the immunostaining of primary human hepatocytes.

Predictive Oncology has developed a three-dimensional (3D) model called the Reconstructed Pancreas (r-Pancreas), which attempts to replicate the pancreatic tumor microenvironment. It successfully recreates the conditions found in pancreatic tissue – including both the epithelial and stromal niches – offering a more physiologically relevant approach to assess new drugs, or combinations of drugs. As described in this Application note, this research model was used in combination with the Spark Cyto multimode reader to investigate the efficacy of gemcitabine, a therapeutic agent against pancreatic tumor cells. To enhance the physiological relevance of the r-Pancreas model, a collagen-rich capsule was introduced, as human pancreatic tumors are known to possess an outer layer of stiff ECM, acting as a physical barrier that hinders drug penetration. Moreover, by incorporating a co-culture of primary activated pancreatic stromal cells and pancreatic tumor cell lines, it was possible to create a more comprehensive 3D model that allows testing of potential therapeutic agents within the pancreatic tumor microenvironment. In this model, pancreatic tumor cells were co-cultured with human pancreatic fibroblasts.

Notes techniques

Analyzing the dose-response relationship using cell-based assays is essential to understanding a drug’s efficacy. However, fixing the appropriate dose range and time point is often challenging. The D300e Digital Dispenser enables accurate delivery of compounds at picoliter levels, spanning a wide dose range – for example, from 0.2 nM to 1 μM – in just a few minutes. This can be combined with the live-cell imaging and full cell incubation capabilities of the Spark Cyto multimode reader to monitor cell proliferation under standard culture conditions (37 ºC, 5 % CO2). This technical note uses the D300e and Spark Cyto to comprehensively capture an anti-cancer drug’s efficacy profile, tracking cell viability with nine doses at 25 time points using luminescence-based and bright field imaging technologies simultaneously.

This Technical Note briefly describes how to use Image Analyzer for the optimization of confluence assessments in bright field images, as well as for object segmentation and counting in fluorescence images.

This application note describes a semi-high throughput approach for the analysis of intracellular Ca2+ and cellular Ca2+ uptake using the Spark Cyto’s multicolor fluorescence imaging and the Image Analyzer™ software’s integrated Voronoi analysis function. Treatment with the calcium ionophore ionomycin was used to increase intracellular Ca2+ concentrations, and Fluo-4 was used in combination with the nuclear counterstain Hoechst 33342 for measurement quantification.

This technical note describes the capabilities of the Spark Cyto to normalize a cellular signal to the cell number, or cell mass, per well. This dramatically improves the overall data quality of the respective cell-based assay and, finally, leads to an improved reproducibility of cell-based experiments and more efficiency in the lab.

Imagerie de fluorescence avec Spark Cyto – Acquisition instantanée avec SparkControl.

Évaluation précise et automatisée de la densité des cellules grâce au champ clair et à l’imagerie de fluorescence…

Visualisation et quantification automatiques de l’expression des protéines sur les microplaques…

Discriminating viable, apoptotic and necrotic cells.

Quantification of life: Dead less ratio with the Spark Cyto imaging cytometer.

A non-invasive way to accurately count cells in brightfield using a deep learning algorithm.

Cell line development plays a crucial role in modern biological research and drug development. Clonal lines derived from a single cell can provide a reproducible and stable platform for drug discovery, studying biological processes and producing recombinant proteins. Genetic engineering and genome editing techniques have enabled the creation of cell lines with specific mutations or gene knockouts, allowing researchers to investigate the function of individual genes and pathways. Additionally, cell lines are used in the production of biologics, such as monoclonal antibodies and recombinant proteins, making the development of new and improved cell lines a critical area of research in both academia and industry. This technical note describes a method for using the Spark Cyto multimode reader to perform whole-well imaging of single mammalian cell clones in 96-well plates, in order to identify optimal clones. Both the Spark and Spark Cyto are capable of verifying monoclonality, however the Spark Cyto offers a faster readout and improved image quality compared to the Spark’s basic imaging functionality, providing higher throughput clone identification.

This technical note describes the use of the Uno Single Cell Dispenser to isolate single cells. This instrument harnesses microfluidic digital dispensing technology to gently isolate viable cells for various downstream applications, including cell line development.

The viability of the single cell post dispensing was assessed by addition of a fluorescent dye, that bound to the DNA of cells with impaired membrane integrity, using whole-well fluorescence imaging functions of the Spark Cyto.

Cell outgrowth rate was determined 10 days after single cell isolation with the Uno, using whole-well brightfield imaging. Using Uno and Spark Cyto together, enables simple single cell isolation and determination of monoclonal cell outgrowth for variety of downstream application.

Livre blanc

Gain de temps et d’argent pour les laboratoires …

Guide d'instruction

Cell-based assays have a variety of practical uses within scientific research and are an integral component of many scientists’ workflows from testing tumor resistance for cancer research to helping identify novel therapeutic compounds in drug discovery.

Brochure et valeurs de performance typiques

Spark Cyto est une plateforme de lecture multimode équipée d’un module d’imagerie de fluorescence perfectionné pour la cytométrie en temps réel.

Lisez la brochure de Spark Cyto
Voir les valeurs de performance typiques de Spark Cyto

Automatisation pour un meilleur débit

Le concept Spark Motion de Tecan permet une automatisation des expériences sur cellules avec un maximum de 40 plaques.

  • Une incubation automatisée des cellules et une analyse d’un maximum de 40 plaques
  • L’analyse de cinétique de croissance multiplex ( ex. luminescence et imagerie) renforce la reproductibilité
  • La technologie brevetée d’ouverture du couvercle dans le Spark Cyto protège les plaques même en dehors de l’incubateur permettant d’économiser les coûts liés à l’acquisition d’une enceinte de sécurité biologique dédiée.
  • Extension possible au moyen d’instruments supplémentaires
Intéressé(e) par l’automatisation complète de votre plan de travail?

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Webinaire en vedette

Find out about the benefits of using 3D culture models in oncology drug discovery. This webinar will focus on the importance of the tumor micro-environment and tissue-associated extracellular matrix (ECM) for obtaining accurate drug response data, using the novel analytical capabilities of the Spark® Cyto multimode imaging plate reader.

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